A pinta preta, causada por Guignardia citricarpa, é uma das principais doenças que afetam frutos cítricos. A irradiação UV-C tem potencial para ser utilizada como método alternativo para suplementar ou substituir o uso de fungicidas, especialmente por promover resistência contra patógenos. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da irradiação UV-C sobre o desenvolvimento in vitro de G. citricarpa e no controle da pinta preta em laranja pós-colheita. Adicionalmente, foram avaliadas as alterações na cor da casca dos frutos. Crescimento micelial, germinação de conídios e formação de apressórios foram avaliados in vitro após a exposição do fungo a diferentes doses de irradiação. Frutos de laranja 'Valência' naturalmente infectados foram submetidos a diferentes doses de irradiação (0,52; 1,04; 3,13; 7,28; 15,66 e 31,20 kJ m-2) para verificar a possibilidade de controle in vivo. Os frutos foram armazenados a 25ºC/80% UR e avaliados 3, 7, 10 e 14 dias após o tratamento e a área abaixo da curva de progresso da doença foi calculada. A exposição à UV-C afetou a germinação de conídios de G. citricarpa e a formação de apressórios. A irradiação com UV-C não foi capaz de controlar a pinta preta de maneira satisfatória; no entanto, a incidência de lesões de pinta preta quiescentes foi menor em laranjas 'Valência' tratadas em pós-colheita com 7,28 e 15,66 kJ m-2. Doses baixas de UV-C não afetaram o aspecto visual dos frutos. Portanto, a irradiação UV-C pode contribuir para a redução de perdas pós-colheita causadas pela pinta preta dos citros e reduzir o uso ou as doses de fungicidas no controle desta doença.

Black spot, caused by Guignardia citricarpa, is one of the main diseases affecting citrus fruits. UV-C irradiation is known to have potential to be used as an alternative method to supplement or replace the use of fungicides, especially because it promotes resistance against pathogens. The aim of this work was to evaluate the in vitro effects of UV-C irradiation on G. citricarpa development and on the control of black spot in postharvest orange. Additionally, changes in skin color of the fruit as a result of UV-C treatment were evaluated. Mycelial growth, conidial germination and appressoria formation were evaluated in vitro after fungal exposure to different irradiation doses. Also, 'Valência' oranges naturally infected were submitted to different irradiation doses to check the possibility of in vivo control. Fruit were stored at 25ºC/80% RH and evaluated 3, 7, 10 and 14 days after treatment and area under the disease progress curve was calculated. UV-C irradiation affected conidial germination of G. citricarpa and apressorium formation. UV-C irradiation was not able to control citrus black spot on fruit at a satisfactory level; however, incidence of quiescent black spot lesions was lower on postharvest 'Valência' orange treated with 7.28 and 15.66 kJ m-2. Low UV-C doses did not affect the visual aspect of fruit. Thus, UV-C irradiation can contribute for the reduction of postharvest losses caused by citrus black spot and reduce the use or doses of fungicides on disease control.

Visando esclarecer alguns eventos bioquímicos durante o processo de infecção no patossistema Puccinia psidii x eucalipto, comparou-se o metabolismo relacionado à defesa em folhas em diferentes níveis de desenvolvimento, em clones (Eucalyptus grandis x E. urophylla) denominados VR e C0, com sessenta dias de idade, resistente e suscetível à ferrugem, respectivamente, determinando-se a atividade de peroxidases e quitinases. Cada tratamento foi composto de 4 repetições, em delineamento inteiramente casualizado, considerando: 2 clones, inoculados e não inoculados com P. psidii; pulverizados com acibenzolar-S-metil (ASM) e água destilada; representados pelo 1º, 2º e 4º pares de folha (com tamanho equivalente a 1/5, 2/5 e 4/5 do desenvolvimento foliar total, respectivamente). A coleta das folhas ocorreu em 4 períodos: 0, 24, 72 e 96 horas após a inoculação (HAI). Os resultados obtidos evidenciaram que apesar de apresentarem níveis superiores de atividade de quitinases e peroxidases, o efeito do ASM ou o efeito da P. psidii não alteraram a atividade dessas enzimas em folhas desenvolvidas (4º par) no decorrer do período. Alterações nos níveis das enzimas após a inoculação apenas foram observadas nas folhas em desenvolvimento (1º e 2º pares), evidenciando que a resposta à infecção foi acompanhada pela síntese dessas enzimas. Os maiores incrementos nas atividades enzimáticas ocorreram nas plantas do clone resistente 72 HAI e nas plantas do clone suscetível que foram tratadas previamente com ASM e posteriormente inoculadas com o P. psidii.

To elucidate some biochemical processes during infection in the pathosystem Puccinia psidii x eucalyptus, the defense metabolism in different-stage leaves was compared between rust-resistant and susceptible clones, respectively. In addition, chitinase and peroxidase activities were assayed. Each treatment consisted of 4 replicates, in a completely randomized design: 2 clones, inoculated and not inoculated with P. psidii; sprayed with acibenzolar-S-methyl (ASM) and distilled water; and represented by the 1st leaf pair (size equivalent to 1/5 total leaf development), 2nd pair (2/5 total development), and 4th pair (4/5 total leaf length). Leaves were harvested in 4 periods: 0, 24, 72 and 96 hours after inoculation. Results indicated that ASM treatment or P. psidii action led to higher chitinase and peroxidase activity level but did not alter the expression of these activities in developed leaves (4th pair) during the experiment. Alterations in enzyme levels after inoculation were only observed in developing leaves (1st and 2nd pairs), which suggests that the response to infection was concomitant to chitinase and peroxidase synthesis. The highest increases in enzymatic activities were observed in resistant clones at 72 hours after inoculation and in susceptible ones previously treated with ASM and later inoculated with the pathogen.

A ocorrência de resistência a fungicidas é uma das mais importantes conseqüências da agricultura moderna. Este fato pode ser resultado de mutações em genes codificadores de resistência a fungicidas (resistência quantitativa) ou a diferentes mecanismos que são induzidos por stresse devido a doses subletais dos produtos utilizados. Estes mecanismos produzem diferentes e variados níveis de resistência (resistência quantitativa). Também é discutido se o uso extensivo de fungicidas em ambientes agricultáveis é relacionado ou não com a ocorrência de resistência em ambientes clínicos. Além disso, também são fornecidas recomendações de como prevenir ou mesmo retardar o desenvolvimento de resistência a fungicidas em patógenos.

In this review article, we show that occurrence of fungicide resistance is one of the most important issues in modern agriculture. Fungicide resistance may be due to mutations of genes encoding fungicide targets (qualitative fungicide resistance) or to different mechanisms that are induced by sub-lethal fungicide stress. These mechanisms result in different and varying levels of resistance (quantitative fungicide resistance). We discuss whether or not extensive use of fungicides in agricultural environments is related to the occurrence of fungicide resistance in clinical environments. Furthermore, we provide recommendations of how development of fungicide resistant pathogen populations may be prevented or delayed.

O presente trabalho foi conduzido com o objetivo de avaliar o efeito dos extratos aquosos dos cogumelos Lentinula edodes e Agaricus blazei e do indutor de resistência acibenzolar-S-metil (ASM) no controle da murcha bacteriana em tomate (Lycopersicon esculentum Mill.), bem como investigar o modo de ação destes produtos na atividade protetora, através de alterações na atividade de determinadas enzimas. Extratos aquosos dos cogumelos e o ASM foram testados na inibição do crescimento da bactéria in vitro. Em casa-de-vegetação, plantas foram tratadas com diferentes doses dos extratos e com ASM (0,05 g/L), dois dias antes da inoculação. As avaliações foram efetuadas com base na severidade da doença e determinação da atividade de algumas enzimas. Os isolados de A. blazei e L. edodes, bem como o ASM, não exerceram efeito inibitório direto no crescimento da bactéria. Quanto à indução de resistência, o isolado Le-96/17 de L. edodes na concentração de 10 % (v/v) e o ASM reduziram significativamente a ocorrência de murcha. As atividades de quitinase, fenilalanina amônia-liase e polifenoloxidase não foram alteradas para a maioria dos tratamentos, porém foi constatado um aumento na atividade de quitinase nas plantas tratadas com ASM. Para a peroxidase, os tratamentos ASM, Abl-26 e Le-96/17 ocasionaram aumentos na atividade da enzima e, com base nos resultados, o cogumelo L. edodes e o ASM apresentam potencial para reduzir a murcha bacteriana provavelmente através da indução de resistência.

This work deals with the effect of aqueous extracts from the mushrooms Lentinula edodes and Agaricus blazei and the inducer of resistance acibenzolar-S-methyl (ASM) on the control of bacterial wilt in tomato (Lycopersicon esculentum Mill.), as well as investigating changes in enzyme activities. Aqueous extracts of the mushrooms and ASM were tested for inhibition of bacterial growth in vitro. Plants were treated with different concentrations of the extracts and with ASM two days before inoculation in greenhouse conditions. The evaluations were based upon disease severity and activity of some enzymes. In general, the isolates of A. blazei and L. edodes, as well as ASM, did not inhibit in vitro bacterial growth. In treated plants, the isolate Le-96/17 10 % (v/v) of L. edodes and ASM significantly reduced bacterial wilt. Chitinase, phenylalanine ammonia-lyase and polyphenoloxidase activities were not changed for most of the treatments; however, increased chitinase activity was verified in plants treated with ASM. The ASM, Abl-26 and Le-96/17 treatments increased peroxidase activity in plants and, based upon the results, L. edodes mushroom and ASM both exhibit potential to reduce bacterial wilt in tomato plants, probably by inducing resistance.

O cogumelo shiitake (Lentinula edodes) vem sendo utilizado com objetivos de prevenir e controlar doenças em humanos e em vegetais. O tratamento com o extrato aquoso de basidiocarpos do cogumelo propiciou uma redução significativa na severidade da antracnose em plantas de pepino, provocada por Colletotrichum lagenarium, e um aumento na atividade de peroxidases nos tecidos foliares. Desse modo, com o objetivo de obter moléculas de interesse agronômico destinadas à proteção de plantas, o extrato aquoso bruto de basidiocarpos de L. edodes foi fracionado inicialmente com sulfato de amônio. A fração correspondente a 40-80% de saturação (p40-80) foi a mais efetiva em reduzir a antracnose em cotilédones de pepino, sendo então submetida à cromatografia de troca aniônica (CTA). Após a CTA, seis picos protéicos foram obtidos, e o pico V, contendo em média 34% das proteínas presentes em p40-80, provocou o acúmulo de peroxidases nos cotilédones de pepino, bem como reduziu a antracnose. A separação eletroforética das proteínas do pico V revelou a presença de mais de uma banda no gel de poliacrilamida. Portanto, estes procedimentos resultaram na purificação parcial de elicitores presentes no basidiocarpo de L. edodes.

The shiitake mushroom (Lentinula edodes) has been used in research involving the prevention and the control of human and plant diseases. In cucumber plants, treated with aqueous extracts from mushroom basidiocarps, there was a reduction in anthracnose severity caused by Colletotrichum lagenarium, and an increase in peroxidase activity in the leaves. With the aim of obtaining molecules of agronomic interest, the crude aqueous extract from L. edodes basidiocarp was fractioned with ammonium sulfate. The fraction corresponding to 40-80% of saturation (p40-80), the most effective in reducing anthracnose on cucumber cotyledons, was submitted to anion exchange chromatography (AEC). After AEC, six protein peaks were obtained and the peak V, containing 34% of the proteins present in p40-80, induced peroxidase increase in the cucumber cotyledons besides reducing anthracnose severity. Separation of peak V proteins by SDS-gel electrophoresis revealed the presence of more than one band in the gel. Thus, a partial purification of elicitors present in the L. edodes basidiocarp was achieved.

Avaliou-se a transmissão de Passion fruit woodiness virus (PWV) por Aphis gossypii (Glover). Em dois experimentos independentes, o afídeo transmitiu o PWV para maracujazeiros com taxas de 75% e 100%, ao se depositarem oito e doze afídeos virulíferos por planta, respectivamente. No final dos testes, observaram-se, em algumas plantas de maracujá, formas ápteras e ninfas de A. gossypii, sugerindo a colonização dessas plantas pelo afídeo. Esse parece ser o primeiro relato da colonização de Passiflora edulis f. flavicarpa (Deneger) por uma espécie de afídeo.

The transmission of Passion fruit woodiness virus (PWV) by Aphis gossypii (Glover) was evaluated. In two independent experiments, A. gossypii transmitted PWV to passion fruit plants at the rates of 75% and 100%, when eight and twelve viruliferous aphids were deposited by plant, respectively. At the end of the tests, nymphs of A. gossypii were observed in some of the passion fruit plants, suggesting that the aphid species was colonizing the plants. This seems to be the first report of Passiflora edulis f. flavicarpa (Deneger) colonization by a species of aphid.

Saccharomyces cerevisiae é uma levedura com potencial para o controle de doenças de plantas, pois apresenta a capacidade de sintetizar compostos antibióticos, habilidade de competição por espaço e nutrientes no filoplano de muitas espécies vegetais, além de possuir elicitores na parede celular. O presente trabalho teve como objetivos avaliar a produtividade de duas cultivares de sorgo (Sorghum bicolor) tratadas com a levedura, e verificar o controle da antracnose, causada por Colletotrichum sublineolum e da mancha foliar, provocada por Exserohilum turcicum. Os experimentos foram conduzidos em campo, em um delineamento de blocos ao acaso, com sete tratamentos e quatro repetições. Aplicações semanais de S. cerevisiae (Fermento Biológico Fleischmann - 25 mg/ml) reduziram significativamente a antracnose em sorgo cv. Tx-398B e melhoraram a produtividade da mesma. Na cv. 910753, uma única aplicação com a levedura foi suficiente para reduzir o progresso da mancha foliar, porém a produtividade não foi elevada por qualquer um dos tratamentos. Conclui-se que S. cerevisiae apresenta um bom desempenho no campo para o controle de doenças foliares em sorgo, melhorando ou não comprometendo a produtividade da cultura, na dependência da cultivar utilizada.

Saccharomyces cerevisiae is a yeast with potential to control plant diseases by producing antibiotic compounds. It has shown, a great ability to compete at phyloplane for space and nutrients and by having elicitors in the cell walls. The present study was carried out to evaluate the productivity of sorghum (Sorghum bicolor) plants treated with the yeast and control of sorghum leaf diseases caused by Colletotrichum sublineolum and Exserohilum turcicum. The trials were conducted in the field, in a randomized block design, with seven treatments and four replicates. Weekly sprayings with commercial baker's yeast (Fermento Biológico Fleischmann - 25 mg/ml) significantly reduced the anthracnose on sorghum Tx-398B cultivar and improved its production. On the other hand, for the 910753 cultivar, a single yeast application was enough to reduce leaf spot progress, although production was not increased by any of the treatments. Thus, S. cerevisiae was able to control sorghum leaf diseases in the field, either improving or maintaining productivity, depending upon the cultivar used.

As raízes de eucalipto (Eucalyptus urophylla) podem estar associadas a fungos como Pisolithus tinctorius, formando uma simbiose conhecida como ectomicorriza, mas também podem estar colonizadas por fungos patogênicos, como Rhizoctonia solani, agente causal do tombamento de plantas em viveiros. O objetivo deste trabalho foi verificar a presença de atividade inibitória de tripsina, uma serino-protease, em raízes de E. urophylla e a atividade de tripsina em filtrados desses fungos. Alíquotas de extrato protéico bruto de raízes de E. urophylla e frações protéicas parcialmente purificadas por cromatografia de exclusão molecular, do tipo Sephacryl S-100-HR, foram testadas para atividade inibitória de tripsina. Proteínas do extrato ou das frações, quando incubadas com o substrato BAPNA (a-benzoil-arginina-p-nitroanilida) e tripsina comercial na presença de tampão Tris-HCl 0,1 M (pH 8,0), resultou em atividade de inibidor de tripsina ao redor de 80%. Filtrados de meios de cultura de P. tinctorius e R. solani foram parcialmente purificados em cromatografia de exclusão molecular, porém atividade de tripsina sobre o substrato BAPNA não foi verificada em nenhuma das frações. Portanto, não foi possível estabelecer uma correlação direta entre o inibidor da planta e proteases dos fungos. Os resultados apresentados abrem novas perspectivas para o estudo dessas proteínas nas interações entre patógenos e simbiontes para espécies de eucalipto.

Roots of eucalyptus (Eucalyptus urophylla) can be associated with fungi such as Pisolithus tinctorius, thus forming an ectomycorrhiza, or be colonized by pathogenic fungi, such as Rhizoctonia solani, agent of damping-off in nursery plants. The objective of this work was to verify the presence and activity of trypsin inhibitor, a serino-protease, in roots of E. urophylla and the activity of trypsin in filtrate of these fungi. The crude protein extract from roots and fractions partially purified by molecular sieving chromatography, using Sephacryl S-100-HR, was tested for trypsin inhibitory activity. The protein extracts or fractions, when incubated with BAPNA (a-benzoyl-arginyl-p-nitroanilide) as substrate, in presence of 0.1 M Tris-HCl buffer (pH 8,0), showed activity of trypsin inhibitor around 80%. Culture filtrates from P. tinctorius and R. solani isolates were also semi-purified by chromatography; however, no trypsin activity on BAPNA substrate was observed. Due to this, it was impossible to establish a direct correlation between the plant inhibitor and potential fungal proteases. The results presented here open new perspectives for the study of proteins in the interactions between pathogens and symbionts with eucalyptus species.

Devido à grande variedade fisiológica e morfológica entre os fungos ectomicorrízicos, é possível observar variações no seu comportamento durante o estabelecimento da simbiose. Este trabalho teve como objetivos caracterizar as etapas da infecção micorrízica por dois isolados de P. tinctorius em E. urophylla, além de verificar a ocorrência de defesas estruturais e bioquímicas na planta. Plântulas de E. urophylla foram inoculadas com os isolados de P. tinctorius obtidos de eucalipto (1604) ou de Pinus (185). Após 0, 12, 24, 72, 96 e 120 horas da inoculação com cada um dos isolados, foi efetuada a dosagem de compostos fenólicos no tecido radicular. Nestes mesmos períodos foram feitos cortes anatômicos das raízes para verificar o desenvolvimento da infecção. Os cortes histológicos não evidenciaram reações estruturais de defesa das plantas nestes períodos testados. No entanto, foi observada colonização mais rápida pelo isolado 1604, o qual iniciou a adesão à raiz 24 horas após a inoculação. O isolado 185 só foi observado na raiz após 96 horas. A dosagem de compostos fenólicos mostrou variação significativa durante a infecção pelo isolado 185 e maior concentração nas raízes inoculadas com este isolado após 96 horas da inoculação. Porém, este acúmulo não impediu a continuidade de seu desenvolvimento na raiz. Neste trabalho não foi observada relação entre o atraso na infecção pelo isolado 185 e a produção de compostos fenólicos pelas raízes.

Physiological and structural diversity of ectomycorrhizal fungi can lead to differences in their behaviour during root infection and colonization. In incompatible interactions, the plant reacts against infection with structural and biochemical defenses, including production of antifungal compounds like phenolics. This study investigated the initial stages of ectomycorrhizal infection in interactions between P. tinctorius and E. urophylla to determine the plant reaction. E. urophylla seedlings were inoculated with a compatible (1604) or an incompatible (185) isolate of P. tinctorius. Extration of phenolic compounds was carried out at 0, 12, 24, 72, 96 and 120 hours after inoculation. At the same time, root samples were collected, processed and embedded in glycol methacrylate resin. Sections were studied under ligth microscopy. Ectomycorrhiza was formed on eucalyptus roots by 96 hours after inoculation with isolate 185 and by 24 hours in plants inoculated with isolate 1604. Structural reactions were not observed by light microscopy. On the other hand, a higher concentration of phenolic compounds in roots inoculated with the isolate 185 was observed 96 hours after inoculation. Although only plants inoculated with isolate 185 showed significant differences in phenolic concentration at the various infection stages, phenol accumulation could not be associated with delay in infection.